The role of serum Glypican-3 (GPC-3) to predict the therapeutic response and clinical outcome in patients with hepatocallular carcinoma: the GRETHA study
ProgettoIl carcinoma epatocellulare (HCC) è il sesto tumore più comune al mondo e rappresenta oltre il 90% dei tumori primari del fegato. Indipendentemente dall’eziologia sottostante della malattia epatica cronica, la cirrosi rappresenta il principale fattore di rischio per lo sviluppo dell’HCC.
L'assegnazione del trattamento e la previsione della prognosi dipendono principalmente dello stadi tumorale, dalla funzionalità epatica e dal performance status (PS). Tuttavia, l’HCC è caratterizzato da un’eterogeneità sia fenotipica che molecolare che può influenzare la risposta al trattamento e la sopravvivenza dei pazienti. Pertanto, la disponibilità di uno strumento in grado di stratificare i pazienti con HCC al fine di personalizzare le opzioni di trattamento rappresenta un’esigenza insoddisfatta.
Glypican-3 (GPC-3) è un membro della famiglia dei proteoglicani eparan solfato, sovraespressi durante l'embriogenesi e l'organogenesi; il mRNA e le proteine del GPC-3 sono espressi in oltre l'80% degli HCC ma non nei tessuti normali ad eccezione della placenta e del fegato fetale. Ad oggi, diversi studi hanno evidenziato il valore diagnostico e prognostico dell'espressione di GPC-3 nel tessuto epatico; tuttavia, studi che hanno valutato il ruolo prognostico della misurazione del GPC-3 sierico nei pazienti con HCC
sono scarsi.
Obiettivi
1) indagare la correlazione tra i livelli sierici di GPC-3 e lo stato del tumore (definito da numero e dimensione dei noduli, presenza di invasione vascolare, diffusione extra-epatica) secondo il sistema di stadiazione Barcelona-Clinic Liver Cancer (BCLC);
2) valutare l'utilità del GPC-3 sierico per l'identificazione di un'appropriata assegnazione terapeutica e per la previsione della risposta alla terapia (terapie loco-regionali e sistemiche);
3) valutare il valore prognostico del GPC-3 sierico in base a diversi endpoint quali la sopravvivenza globale (OS), il tasso di risposta obiettiva (ORR) e il tasso di controllo della malattia (DCR).
4) confrontare la prestazione prognostica complessiva (OS, ORR e DCR) di GPC-3 con l'alfa-fetoproteina (AFP) e la proteina indotta dall'assenza di vitamina K o antagonista II (PIVKA-II).
5) studiare l'accuratezza di GPC-3 per la previsione della recidiva di HCC in pazienti con storia pregressa di HCC.
Endpoint dello studio
L'endpoint primario dello studio è la OS, definita come il tempo intercorrente tra la diagnosi di HCC e la morte, indipendentemente dalla recidiva della malattia. La risposta alla terapia sarà definita secondo i criteri di valutazione della risposta modificata nei tumori solidi (mRECIST) come risposta completa (CR; scomparsa di tutte le lesioni target), risposta parziale (PR; almeno una diminuzione del 30% nella somma delle lesioni target), malattia progressiva (PD; almeno un aumento del 20% nella somma dei diametri delle lesioni target) e malattia stabile (SD; definita come non rispondente ai criteri né per la malattia progressiva né per una PR). Gli endpoint secondari saranno ORR (CR+PR vs SD+PD), DCR (CR+PR+SD vs PD) e tasso di recidiva di HCC.
Pazienti e metodi
La coorte di studio includerà pazienti affetti da HCC già arruolati nel progetto MIRRA (CEI-452) dell'Unità di Epatologia e Gastroenterologia, Dipartimento di Scienze Mediche, dell'Università di Torino da giugno 2012 a dicembre 2021.
Criteri di inclusione: età >18 anni; la diagnosi di HCC eseguita mediante criteri non invasivi (tomografia computerizzata multifasica, risonanza magnetica con contrasto dinamico o ecografia con mezzo di contrasto) o istologica (biopsia) secondo le linee guida EASL; disponibilità di un campione di siero al momento della diagnosi di HCC; consenso informato scritto firmato.
Per tutti i pazienti, le caratteristiche demografiche (età e sesso), antropometriche (indice di massa corporea), biochimiche (test di funzionalità epatica), cliniche (eziologia sottostante della malattia epatica, eventi correlati al fegato, comorbilità, terapie precedenti) e oncologiche (numero di noduli di HCC e dimensioni, invasione vascolare, diffusione extra-epatica, terapia [ablazione, resezione, trapianto, chemioembolizzazione, terapia sistemica o cure palliative e migliori cure di supporto] e esito) e tutti i pazienti con HCC saranno classificati in base alla stadiazione BCLC sistema come segue:
Stadio 0 (molto precoce): singolo nodulo <2 cm, funzionalità epatica preservata (punteggio Child-Pugh-Turcotte [CPT] = A) e buono stato di salute (PS = 0);
Stadio A (precoce): singoli o 2-3 noduli <3 cm, funzionalità epatica preservata (CPT = A-B), e buono stato di salute (PS = 0);
Stadio B (intermedio): funzionalità epatica multinodulare, non resecabile, preservata (CPT = A-B) e buono stato di salute (PS = 0);
Stadio C (avanzato): invasione portale/diffusione extraepatica, funzionalità epatica preservata (CPT = A-B) e sintomi correlati al cancro (PS = 1-2)
Stadio D (stadio terminale): HCC non trapiantabile, funzionalità epatica allo stadio terminale (CPT = C) e performance status molto scarso (PS = 3-4)
Il numero previsto di pazienti per l'analisi finale è 750 (obiettivo 1, 2 e 3).
Per raggiungere l'obiettivo 4 dello studio, l'analisi sarà effettuata su un sottogruppo di 250 pazienti.
Per studiare l'accuratezza del GPC-3 per la previsione della recidiva di HCC (obiettivo 5), una coorte distinta di 60 pazienti con cirrosi correlata all'HCV, con precedente storia di HCC, sottoposti a terapia con antivirali ad azione diretta (DAA) saranno inclusi nello studio (tasso di recidiva cumulativo ≈ 50%). Misureremo GPC-3 nei campioni di siero raccolti al mese 1 durante la terapia (T1) e al mese 3 dopo la terapia (T2), e investigheremo l'associazione tra i valori sierici di GPC-3 a T1, a T2 e la variazione da Da T1 a T2 (Δ) con recidiva di HCC durante la FU.
Misurazione dei biomarcatori
I livelli sierici di GPC-3 saranno misurati mediante kit di test immunometrico enzimatico (CanAg Glypican-3 EIA, Fujirebio Diagnostics AB, Gothenburg, Svezia), mentre i valori sierici di PIVKA-II e AFP saranno determinati mediante test immunoenzimatici in chemiluminescenza (CLEIA) su sistema completamente automatizzato Lumipulse G600 II (Fujirebio, Tokyo, Giappone) in accordo con le istruzioni del produttore.
Analisi statistica
L'analisi statistica sarà effettuata utilizzando MedCalc® v.18.9.1 (MedCalc Software Ltd, Ostenda, Belgio). A seconda della normalità dei dati verranno adottati test parametrici o non parametrici. Il valore prognostico di GPC-3, AFP e PIVKA-II sierici in base ai diversi endpoint clinici surrogati sarà valutato mediante analisi di sopravvivenza (metodo Kaplan-Meier). L'effetto dei diversi fattori di rischio sulla sopravvivenza sarà esaminato mediante l'analisi di regressione dei rischi proporzionali di Cox. Per tutte le analisi, p<0,05 sarà considerato statisticamente significativo.
Cronologia dello studio
La raccolta dei dati e la caratterizzazione della coorte di studio dureranno 6 mesi, i test dei biomarcatori 3 mesi e la stesura di statistiche e report scientifico avrà luogo negli ultimi 6 mesi del periodo di studio.
L'assegnazione del trattamento e la previsione della prognosi dipendono principalmente dello stadi tumorale, dalla funzionalità epatica e dal performance status (PS). Tuttavia, l’HCC è caratterizzato da un’eterogeneità sia fenotipica che molecolare che può influenzare la risposta al trattamento e la sopravvivenza dei pazienti. Pertanto, la disponibilità di uno strumento in grado di stratificare i pazienti con HCC al fine di personalizzare le opzioni di trattamento rappresenta un’esigenza insoddisfatta.
Glypican-3 (GPC-3) è un membro della famiglia dei proteoglicani eparan solfato, sovraespressi durante l'embriogenesi e l'organogenesi; il mRNA e le proteine del GPC-3 sono espressi in oltre l'80% degli HCC ma non nei tessuti normali ad eccezione della placenta e del fegato fetale. Ad oggi, diversi studi hanno evidenziato il valore diagnostico e prognostico dell'espressione di GPC-3 nel tessuto epatico; tuttavia, studi che hanno valutato il ruolo prognostico della misurazione del GPC-3 sierico nei pazienti con HCC
sono scarsi.
Obiettivi
1) indagare la correlazione tra i livelli sierici di GPC-3 e lo stato del tumore (definito da numero e dimensione dei noduli, presenza di invasione vascolare, diffusione extra-epatica) secondo il sistema di stadiazione Barcelona-Clinic Liver Cancer (BCLC);
2) valutare l'utilità del GPC-3 sierico per l'identificazione di un'appropriata assegnazione terapeutica e per la previsione della risposta alla terapia (terapie loco-regionali e sistemiche);
3) valutare il valore prognostico del GPC-3 sierico in base a diversi endpoint quali la sopravvivenza globale (OS), il tasso di risposta obiettiva (ORR) e il tasso di controllo della malattia (DCR).
4) confrontare la prestazione prognostica complessiva (OS, ORR e DCR) di GPC-3 con l'alfa-fetoproteina (AFP) e la proteina indotta dall'assenza di vitamina K o antagonista II (PIVKA-II).
5) studiare l'accuratezza di GPC-3 per la previsione della recidiva di HCC in pazienti con storia pregressa di HCC.
Endpoint dello studio
L'endpoint primario dello studio è la OS, definita come il tempo intercorrente tra la diagnosi di HCC e la morte, indipendentemente dalla recidiva della malattia. La risposta alla terapia sarà definita secondo i criteri di valutazione della risposta modificata nei tumori solidi (mRECIST) come risposta completa (CR; scomparsa di tutte le lesioni target), risposta parziale (PR; almeno una diminuzione del 30% nella somma delle lesioni target), malattia progressiva (PD; almeno un aumento del 20% nella somma dei diametri delle lesioni target) e malattia stabile (SD; definita come non rispondente ai criteri né per la malattia progressiva né per una PR). Gli endpoint secondari saranno ORR (CR+PR vs SD+PD), DCR (CR+PR+SD vs PD) e tasso di recidiva di HCC.
Pazienti e metodi
La coorte di studio includerà pazienti affetti da HCC già arruolati nel progetto MIRRA (CEI-452) dell'Unità di Epatologia e Gastroenterologia, Dipartimento di Scienze Mediche, dell'Università di Torino da giugno 2012 a dicembre 2021.
Criteri di inclusione: età >18 anni; la diagnosi di HCC eseguita mediante criteri non invasivi (tomografia computerizzata multifasica, risonanza magnetica con contrasto dinamico o ecografia con mezzo di contrasto) o istologica (biopsia) secondo le linee guida EASL; disponibilità di un campione di siero al momento della diagnosi di HCC; consenso informato scritto firmato.
Per tutti i pazienti, le caratteristiche demografiche (età e sesso), antropometriche (indice di massa corporea), biochimiche (test di funzionalità epatica), cliniche (eziologia sottostante della malattia epatica, eventi correlati al fegato, comorbilità, terapie precedenti) e oncologiche (numero di noduli di HCC e dimensioni, invasione vascolare, diffusione extra-epatica, terapia [ablazione, resezione, trapianto, chemioembolizzazione, terapia sistemica o cure palliative e migliori cure di supporto] e esito) e tutti i pazienti con HCC saranno classificati in base alla stadiazione BCLC sistema come segue:
Stadio 0 (molto precoce): singolo nodulo <2 cm, funzionalità epatica preservata (punteggio Child-Pugh-Turcotte [CPT] = A) e buono stato di salute (PS = 0);
Stadio A (precoce): singoli o 2-3 noduli <3 cm, funzionalità epatica preservata (CPT = A-B), e buono stato di salute (PS = 0);
Stadio B (intermedio): funzionalità epatica multinodulare, non resecabile, preservata (CPT = A-B) e buono stato di salute (PS = 0);
Stadio C (avanzato): invasione portale/diffusione extraepatica, funzionalità epatica preservata (CPT = A-B) e sintomi correlati al cancro (PS = 1-2)
Stadio D (stadio terminale): HCC non trapiantabile, funzionalità epatica allo stadio terminale (CPT = C) e performance status molto scarso (PS = 3-4)
Il numero previsto di pazienti per l'analisi finale è 750 (obiettivo 1, 2 e 3).
Per raggiungere l'obiettivo 4 dello studio, l'analisi sarà effettuata su un sottogruppo di 250 pazienti.
Per studiare l'accuratezza del GPC-3 per la previsione della recidiva di HCC (obiettivo 5), una coorte distinta di 60 pazienti con cirrosi correlata all'HCV, con precedente storia di HCC, sottoposti a terapia con antivirali ad azione diretta (DAA) saranno inclusi nello studio (tasso di recidiva cumulativo ≈ 50%). Misureremo GPC-3 nei campioni di siero raccolti al mese 1 durante la terapia (T1) e al mese 3 dopo la terapia (T2), e investigheremo l'associazione tra i valori sierici di GPC-3 a T1, a T2 e la variazione da Da T1 a T2 (Δ) con recidiva di HCC durante la FU.
Misurazione dei biomarcatori
I livelli sierici di GPC-3 saranno misurati mediante kit di test immunometrico enzimatico (CanAg Glypican-3 EIA, Fujirebio Diagnostics AB, Gothenburg, Svezia), mentre i valori sierici di PIVKA-II e AFP saranno determinati mediante test immunoenzimatici in chemiluminescenza (CLEIA) su sistema completamente automatizzato Lumipulse G600 II (Fujirebio, Tokyo, Giappone) in accordo con le istruzioni del produttore.
Analisi statistica
L'analisi statistica sarà effettuata utilizzando MedCalc® v.18.9.1 (MedCalc Software Ltd, Ostenda, Belgio). A seconda della normalità dei dati verranno adottati test parametrici o non parametrici. Il valore prognostico di GPC-3, AFP e PIVKA-II sierici in base ai diversi endpoint clinici surrogati sarà valutato mediante analisi di sopravvivenza (metodo Kaplan-Meier). L'effetto dei diversi fattori di rischio sulla sopravvivenza sarà esaminato mediante l'analisi di regressione dei rischi proporzionali di Cox. Per tutte le analisi, p<0,05 sarà considerato statisticamente significativo.
Cronologia dello studio
La raccolta dei dati e la caratterizzazione della coorte di studio dureranno 6 mesi, i test dei biomarcatori 3 mesi e la stesura di statistiche e report scientifico avrà luogo negli ultimi 6 mesi del periodo di studio.