Background
L'interrogazione fenotipica e funzionale delle cellule T Vγ9Vδ2 del midollo osseo (BM) ha rivelato un'inaspettata soppressione immunitaria precoce e persistente
immunosoppressione nella gammopatia monoclonale di significato indeterminato (MGUS) e nel mieloma multiplo (MM). Vγ9Vδ2
Le cellule T si sono dimostrate imbattibili nella capacità di percepire il contesto immunosoppressivo del BM, compreso il
checkpoint/immune checkpoint-ligand (ICP/ICP-L). Sfortunatamente, i tentativi di recuperare l'attività delle cellule T del midollo osseo anti-mieloma Vγ9Vδ2
BM Vγ9Vδ2 mediante un singolo blocco ICP (ad esempio, anti-PD-1) sono falliti in vitro e in vivo.
Il trattamento mirato al CD38 è emerso come una delle immunoterapie passive più efficaci nei pazienti con MM recidivati/refrattari.
Relazioni inaspettate tra PD-1/PD-1L e CD38 sono state riportate nel cancro solido. Nel MM, le cellule T Vγ9Vδ2, le cellule stromali
cellule stromali del midollo (BMSC), cellule soppressorie di derivazione mieloide (MDSC) e cellule del mieloma sono bersaglio degli anticorpi anti-CD38
ma esprimono anche ICP/ICP-L. Si può prevedere che le interazioni ICP/ICP-L/CD38 si verifichino anche nel BM di
pazienti con MM, specialmente in seguito a trattamenti anti-CD38 e/o anti-ICP.
Ipotesi
-Le cellule T Vγ9Vδ2 non recuperano completamente la loro attività anti-mieloma dopo il trattamento anti-PD-1 perché upregolano le alternative
ICP;
-L'upregolazione dell'ICP alternativa nelle cellule T Vγ9Vδ2 è accompagnata dall'espressione di ICP-L multiple, nelle cellule del mieloma e nelle cellule vicine nel
cellule vicine nel BM;
-L'upregolazione dell'ICP nelle cellule T Vγ9Vδ2 dipende dal percorso di segnalazione a valle e dai cambiamenti metabolici che sono tracciabili
ed eventualmente drogabili;
-Il cross-talk ICP/CD38 ha un impatto sulla competenza immunitaria delle cellule T Vγ9Vδ2 e limita l'efficacia degli interventi immunitari basati su Vγ9Vδ2.
interventi immunitari basati su cellule T Vγ9Vδ2 e mAbs anti-ICP e anti-CD38.
Obiettivi
-Determinare il repertorio completo dell'espressione di ICP/ICP-L nel BM della MGUS/MM secondo la diagnosi e lo stato della malattia;
-dissezionare i meccanismi di resistenza/suscettibilità al blocco ICP nelle cellule T Vγ9Vδ2 in relazione alla diagnosi e allo
stato clinico (cioè, MGUS, MM alla diagnosi, remissione, ricaduta);
-identificare obiettivi molecolari e metabolici per superare la resistenza al singolo blocco ICP nelle cellule T Vγ9Vδ2 usando approcci inside-out
approcci con piccole molecole e modificatori metabolici piuttosto che approcci outside-in con combinazioni multiple anti-ICP
combinazioni;
-identificare gli incroci molecolari e metabolici tra ICP/ICP-L e CD38 per recuperare l'attività delle cellule T Vγ9Vδ2 anti-mieloma
e rafforzare i trattamenti mirati anti-ICP e anti-CD38;
Disegno sperimentale
Gli esperimenti saranno eseguiti con cellule derivate dal midollo osseo di donatori sani e pazienti MGUS/MM a diversi stadi di
malattia. Le cellule isolate dal sangue periferico serviranno come controlli interni. Le indagini fenotipiche, funzionali e biochimiche
saranno eseguite in condizioni di riposo o dopo l'attivazione specifica delle cellule T Vγ9Vδ2 in presenza di mAbs anti-ICP
e/o mAbs anti-CD38. Sono previste cocolture con BMSC, MDSC e cellule di mieloma in modelli di coltura 2D e 3D per
ricapitolare il microambiente del BM.
Risultati attesi
-Caratterizzazione dell'intero repertorio ICP/ICP-L nel midollo osseo di pazienti MGUS/MM;
-Dissezione delle vie molecolari e/o dei cambiamenti metabolici responsabili dell'espressione e dell'upregolazione di ICP nelle cellule T Vγ9Vδ2.
Vγ9Vδ2;
-Capire il cross-talk tra CD38 e ICP/ICP-L nelle cellule T Vγ9Vδ2, nelle cellule di mieloma e nelle cellule vicine.
Impatto sul cancro
Recupero della competenza immunitaria delle cellule T Vγ9Vδ2 e ottimizzazione del trattamento anti-ICP e anti-